Определение резус-принадлежности
Для определения резус-фактора в настоящее время используют стандартную сыворотку, содержащую определенный титр агглютининов или цоликлон анти-D.
Использование стандартных сывороток
Оснащение: стандартная сыворотка анти-резус двух разных серий, пластина или планшет, пипетка, стеклянные палочки, изотонический раствор хлорида натрия.
Ход работы: на пластину или планшет нанесите по капле антирезусной сыворотки двух разных серий. Стеклянными палочками смешайте небольшое количество крови с сывороткой в обоих рядах. Пластину периодически покачивайте в течение 3 минут, затем добавьте по одной капле изотонического раствора хлорида натрия и продолжайте наблюдение до истечения 5 минут.
Реакция может быть положительной или отрицательной (см. работу 2). Если реакция положительная, то исследуемая кровь содержит резус-фактор, и ее называют резус-положительной. Отрицательная реакция свидетельствует о том, что исследуемая кровь является резус-отрицательной.
Использование цоликлонов
Оснащение: цоликлон анти-D, пластина или планшет, пипетка, стеклянная палочка.
Ход работы: на пластину или планшет нанесите большую каплю (около 0,1 мл) цоликлона анти-D, рядом поместите маленькую каплю (0,01-0,05 мл) исследуемой крови смешайте стеклянной палочкой. Реакция агглютинации начинается через 10-15 секунд, четко выраженная агглютинация наступает через 30-60 секунд. (Для сокращения времени начала реакции планшет можно предварительно подогреть до 37-40о С.) Результаты реакции учитывайте через 3 минуты. Планшет после смешивания реагента с кровью рекомендуется покачивать не сразу, а через 20-30 секунд, для образования более полной крупнолепестковой агглютинации.
Оформление результатов работы: опишите полученные результаты в тетради протоколов опытов. Рекомендуется сделать цветной рисунок, демонстрирующий агглютинацию эритроцитов в каплях сыворотки или цоликлоне. Определите резус-принадлежность исследуемой крови и сделайте вывод, отразив значения определения резус-фактора для клиники.